[摘要]
肝星状细胞（HSC）是肝纤维化发生和发展的主要细胞，将药物选择性地释投到HSC可以提高抗肝纤维化作用，减少不良作用。研究以6-磷酸甘露糖(M6P)修饰的白蛋白（M6P-HSA）为载体， 甘草次酸(G)靶向HSC治疗肝纤维化的可行性。 1. 材料与方法：(1)M6P-HSA和G-M6P-HSA合成：将对硝基苯酚-a-D-甘露糖吡喃糖甙磷酸化，得到对硝基苯酚-6-磷酸-a-D-甘露糖吡喃糖甙。然后用10%钯在活性碳上还原硝基得到对氨基苯酚-6-磷酸-a-D-甘露糖吡喃糖甙，后者用硫光气激活后与人血清白蛋白（HSA）结合。用混合酸酐法将甘草次酸基-30-甘氨酸与M6P28－HSA连接，得到甘草次酸与M6P-结合的最终缀合物（G-M6P-HSA）。用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳确定该产物的分子量。(2)G-M6P-HSA与星状细胞特异性结合的直接免疫荧光检查：以酶解法分离、提取大鼠HSC， 培养2周后，分为5组，骨髓干细胞组、HSC对照组、白蛋白对照组、G-M6P28对照组、G-M6P28-HSA组。在G-M6P28－HSA组和骨髓干细胞组加入0.5mg/ml G-M6P28-HSA，HSC组加入DMEM培养液，白蛋白组加入0.5 mg/ml人白蛋白，G-M6P28-HSA组加入0.5mg/ml G-M6P28-HSA。孵育2h后，用丙酮固定，0.1mol/L PBS洗涤，加入1:50稀释的兔抗人FITC-白蛋白单克隆抗体，室温放置30min。洗涤，固定，封片，镜观。在20倍视野下，随机取5个视野用图像处理仪进行定量灰度扫描，在每个视野内各取10个细胞，求其阳性信号平均灰度值与本底灰度值比值。
2. 结果：(1)M6P28-HSA、G-M6P28-HSA聚丙烯酰胺凝胶电泳：牛血清白蛋白分子量为6.6×104，人血清白蛋白分子量为6.627×104， M6P28-HAS为7.037×104，G-M6P28-HAS为7.383×104。电泳各条带清晰，符合实验要求。(2)骨髓干细胞对照组白蛋白免疫荧光染色阴性，HSC对照组和白蛋白对照组免疫荧光染色弱阳性，三对照组间差异无显著性；M6P28-HSA组、G-M6P28-HSA组星状细胞白蛋白免疫荧光染色均为强阳性，与对照组相比，t值分别为2.432和2.326，P<0.05。M6P28-HSA组与G-M6P28-HSA组之间差异无显著性。
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